我們輸入的數(shù)據(jù)包含 gene ID 和 vector(單樣本)部分,這里的 gene ID 是一個(gè)通用概念,可以是基因、轉(zhuǎn)錄本、酶或蛋白質(zhì)。這里的 vector 可以是樣本的表達(dá)量、倍數(shù)變化, p-value, 組蛋白修飾數(shù)據(jù)等可測(cè)量的屬性。下面我們以一個(gè) RNA-seq 差異分析后的數(shù)據(jù)為例,來(lái)學(xué)習(xí) pathview 的用法。
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在 KEGG PATHWAY Database 查詢(xún),例如查詢(xún)小鼠的"Cell Cycle"這條通路:
得到通路 ID 為"04110",物種為"mmu"
我們通過(guò)指定 gene.data 和 pathway.id 來(lái)觀察我們數(shù)據(jù)里的基因在信號(hào)通路“Pathways in cancer”上的表達(dá)變化:
相比于原始的 KEGG 圖,我們可以使用 graphviz 產(chǎn)生一個(gè)新的布局,并且輸出 PDF 格式的文件:
以下是輸出結(jié)果圖
如果我們想要運(yùn)行的更快一點(diǎn),并且不介意輸出圖片的大小,我們可以分圖層,用 same.layer = F 將節(jié)點(diǎn)顏色和標(biāo)簽添加到另一個(gè)圖層中,并且原來(lái)的 KEGG 基因標(biāo)簽會(huì)變成官方的 gene symbols :
在此基礎(chǔ)上,修改 kegg.native = FALSE ,我們就可以得到一個(gè)主圖與圖例分成兩個(gè)頁(yè)面的 PDF 文件
在原始的 KEGG 視圖中,一個(gè)基因節(jié)點(diǎn)可能代表具有相似或者冗余功能的基因/蛋白質(zhì),我們可以將這種包含多個(gè)基因的節(jié)點(diǎn)拆分成獨(dú)立的節(jié)點(diǎn),這樣可以更好的從基因?qū)用娑皇枪?jié)點(diǎn)層面來(lái)查看數(shù)據(jù)。同時(shí)也可以通過(guò)匯總基因數(shù)據(jù)來(lái)可視化節(jié)點(diǎn)數(shù)據(jù):
為了畫(huà)面有更好的清晰度和可讀性,默認(rèn)不分裂節(jié)點(diǎn),也不單獨(dú)標(biāo)記每個(gè)成員基因。
代謝途徑中,除了基因節(jié)點(diǎn)還有化合物節(jié)點(diǎn),我們可以嘗試?yán)么x途徑( Propanoate metabolism)整合基因數(shù)據(jù)和化合物數(shù)據(jù)。這里的化合物數(shù)據(jù)包括代謝物、藥物,對(duì)它們的測(cè)量和它們的屬性。在這里我們?nèi)匀皇褂弥?RNA-seq 差異分析的數(shù)據(jù)作為 gene data,然后,我們生成模擬化合物或代謝組數(shù)據(jù),并加載適當(dāng)?shù)幕衔?ID 類(lèi)型以進(jìn)行演示:
結(jié)果如下
pathview 可以集成并將多個(gè)樣本或狀態(tài)繪制成一個(gè)圖,我們可以使用多個(gè)重復(fù)樣本模擬化合物數(shù)據(jù):
結(jié)果如下,可以看到基因節(jié)點(diǎn)和化合物節(jié)點(diǎn)被分成多份,對(duì)應(yīng)不同的樣本:
我們可以根據(jù)將化合物數(shù)據(jù)分為絕對(duì)值大于 5 和小于 5 兩類(lèi),構(gòu)成一組離散型數(shù)據(jù):
結(jié)果如下:
Pathview 包中的主函數(shù)是 pathview() ,有著各種參數(shù),是我們用到最多的函數(shù)。在這篇文章中,我們介紹了 pathview()的比較常見(jiàn)的用法,包括包安裝,數(shù)據(jù)準(zhǔn)備,以及其他有用的特性。我們也可以使用 pathxiew 的網(wǎng)頁(yè)版,地址是 。此外,Pathview 在數(shù)據(jù)整合方面有很強(qiáng)大的功能,包含 4800 個(gè)物種,能處理的數(shù)據(jù)屬性和格式包括 連續(xù)/離散數(shù)據(jù)、矩陣/矢量、單個(gè)/多個(gè)樣本數(shù)據(jù) ,包中還具有強(qiáng)大的 ID 轉(zhuǎn)換功能,這些都值得我們進(jìn)一步探索。
生活很好,有你更好
查看GOplot內(nèi)示例數(shù)據(jù)的格式,對(duì)自己的數(shù)據(jù)做處理
觀察結(jié)論:
觀察自己的兩個(gè)數(shù)據(jù)表:
table.legend 設(shè)置為T(mén)時(shí)會(huì)顯示表格
本圖中表格和圖例是出圖后剪切拼合而成,沒(méi)有用R中的拼圖包
ID轉(zhuǎn)換用到的是 bitr() 函數(shù),bitr()的使用方法:
org.Hs.eg.db包含有多種gene_name的類(lèi)型
keytypes() :keytypes(x),查看注釋包中可以使用的類(lèi)型
columns() :類(lèi)似于keytypes(),針對(duì)org.Hs.eg.db兩個(gè)函數(shù)返回值一致
select() :select(x, keys, columns, keytype, ...) eg.
函數(shù)enrichGO()進(jìn)行GO富集分析,enrichGO()的使用方法:
舉例:
前面我給大家詳細(xì)介紹過(guò)
?GO簡(jiǎn)介及GO富集結(jié)果解讀
?四種GO富集柱形圖、氣泡圖解讀
?GO富集分析四種風(fēng)格展示結(jié)果—柱形圖,氣泡圖
?KEGG富集分析—柱形圖,氣泡圖,通路圖
? DAVID GO和KEGG富集分析及結(jié)果可視化
也用視頻給大家介紹過(guò)
? GO和KEGG富集分析視頻講解
最近有粉絲反映說(shuō),利用clusterProfiler這個(gè)包繪制GO富集分析氣泡圖和柱形圖的時(shí)候,發(fā)現(xiàn)GO條目的名字都重疊在一起了。
氣泡圖
柱形圖
這個(gè)圖別說(shuō)美觀了,簡(jiǎn)直不忍直視。經(jīng)過(guò)我的認(rèn)真研究,發(fā)現(xiàn)跟R版本有關(guān)。前面我給大家展示的基本都是R 3.6.3做出來(lái)的圖。很多粉絲可能用的都是最新版本的R 4.1.2。
我們知道R的版本在不停的更新,相應(yīng)的R包也在不停的更新。我把繪制氣泡圖和柱形圖相關(guān)的函數(shù)拿出來(lái)認(rèn)真的研究了一下,終于發(fā)現(xiàn)的癥結(jié)所在。
dotplot這個(gè)函數(shù),多了個(gè) label_format 參數(shù)
我們來(lái)看看這個(gè)參數(shù)究竟是干什么用的,看看參數(shù)說(shuō)明
label_format :
a numeric value sets wrap length, alternatively a custom function to format axis labels. by default wraps names longer that 30 characters
原來(lái)這個(gè)參數(shù)默認(rèn)值是30,當(dāng)標(biāo)簽的長(zhǎng)度大于30個(gè)字符就會(huì)被折疊,用多行來(lái)展示。既然問(wèn)題找到了,我們就來(lái)調(diào)節(jié)一下這個(gè)參數(shù),把他設(shè)置成100,讓我們的標(biāo)簽可以一行展示。
是不是還是原來(lái)的配方,還是熟悉的味道
同樣的柱形圖,我們也能讓他恢復(fù)原來(lái)的容貌。
關(guān)于如何使用R做GO和KEGG富集分析,可參考下文
GO和KEGG富集分析視頻講解
本文名稱(chēng):r語(yǔ)言go富集圖 r語(yǔ)言faithful數(shù)據(jù)集
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