分子生物學技術在國內(nèi)防制蟲媒傳染病領域的應用
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【摘要】 本文綜述了國內(nèi)近年來,分子生物學技術在蟲媒病中蚊媒傳染病防制的應用情況,以期為蚊媒傳
染病的防制、應對突發(fā)公共衛(wèi)生事件中蚊媒傳染病的發(fā)生提供參考.
【關鍵詞】 分子生物學技術;蟲媒;傳染病
蟲媒病是由節(jié)肢動物攜帶病原體傳播的一組疾病.
1992年在國際蟲媒病毒中心登記的已達535種,其中128
種對人有致病性[1].我國法定報告的傳染病中,蟲媒病占
13種,蚊蟲作為媒介,除了傳播病毒性疾病外,還可傳播
寄生蟲病.這類疾病大都屬于自然疫源性疾病,有一定的
地域性和時間性,發(fā)病率低、死亡率高,主要通過媒介的
控制進行防制[2].近年來,隨著分子生物學技術的研究和
發(fā)展,在醫(yī)學領域的應用日趨廣泛,并取得了重大進展,
作者就近年來分子生物學技術在蚊媒傳染病的診斷和防制
等方面的應用綜述如下.
1 常用的分子生物學技術[3]
1·1 核酸分子雜交技術
核酸的分子雜交(molecular hybridization)它是利用核
酸分子的堿基互補原則,在特定的條件下,雙鏈解開成兩
條單鏈,與異源的DNA或RNA (單鏈)復性,若異源
DNA或RNA之間的某些區(qū)域有互補的堿基序列,則在復
性時可形成雜交的核酸分子.雜交的雙方是待測核酸序列
及探針.核酸探針可用放射性核素、生物素或其它活性物
質(zhì)標記.根據(jù)其來源和性質(zhì)可分為cDNA探針、基因組探
針、寡核苷酸探針、RNA探針等.
分類:根據(jù)被測定的對象,分為Southern雜交和
Northern雜交;根據(jù)所用的方法,分為斑點(dot)雜交、
狹槽(slot)雜交和菌落原位雜交;根據(jù)環(huán)境條件:分為液
相雜交和固相雜交.
1·2 聚合酶鏈式反應(polymerase chain reaction, PCR)
是以擬擴增的DNA分子為模板,以一對分別與模板互
補的寡核苷酸片段為引物,在DNA聚合酶的作用下,按照
半保留復制的機理沿著模板鏈延伸直至完成新的DNA合
成.通過不斷重復這一過程,可以使目的DNA片段得到擴
增,同時新合成的DNA片段也可以作為模板,使DNA的
合成量呈指數(shù)型增長.
PCR各種應用模式:兼并引物( degenerate primer)
pcr、套式引物(nested primer) pcr、復合pcr (multiplex
pcr)、反向pcr ( inverse pcr或reverse pcr)、不對稱pcr
(asymmetric pcr)、標記pcr ( lp-pcr)和彩色pcr、加端
pcr、錨定pcr或固定pcr、玻片pcr、反轉(zhuǎn)錄pcr方法檢測
rna、定量pcr.
1·3 DNA芯片
基因芯片又稱DNA芯片(DNA chip)或DNA微陣列
(DNA microarray).是采用光導原位合成或顯微印刷等方
法將大量特定序列的探針分子密集、有序地固定于經(jīng)過相
應處理的載體上,然后加入標記的待測樣品,進行多元雜
交,通過雜交信號的強弱及分布,來分析目的分子的有無、
數(shù)量及序列,從而獲得受檢樣品的遺傳信.特點:具有通
量大,并行性、微量化與自動化等優(yōu)點,但在實踐中其研
究成本較高;方法標準化不足;配套軟件不夠完善.
2 分子生物學技術在蟲媒病診斷的應用
2·1 瘧疾
黃炳成等[4]用pBF2 DNA片斷,經(jīng)標記后作探針,從
多種瘧原蟲DNA樣本中檢出惡性瘧原蟲.基因芯片在瘧原
蟲的研究內(nèi)容還有瘧原蟲新基因發(fā)現(xiàn)[5]、轉(zhuǎn)錄因子調(diào)控網(wǎng)
絡[6]、瘧原蟲適應人體宿主機制[7]、瘧原蟲比較基因組雜
交分析[8]、惡性瘧原蟲抗原變異分子機制[9]以及瘧原蟲攻
擊紅細胞機制[10]等.
2·2 絲蟲病
黃志彪等[11]運用PCR技術檢測血液中的班氏絲蟲微
絲蚴,可檢出lOOul陽性血樣中的l條班氏絲蟲微絲蚴;用
于檢測班氏絲蟲監(jiān)測點540份血液樣本結(jié)果均為陰性,鏡
檢血片結(jié)果亦為陰性.常規(guī)絲蟲檢測是在夜間采血,有資
料顯示[12], SsP/PCR擴增系統(tǒng)可用于檢測班氏絲蟲病患
者血樣中的循環(huán)DNA,能用于周期性或夜間周期性絲蟲病
的日間血檢工作,從根本上改變了絲蟲病的診斷、監(jiān)測和
工作方式.
2·3 登革熱病
鄭夔等[13]應用多重PCR技術快速鑒定4種血清型登
革病毒,并在同一反應管中進行多重PCR對登革病毒進行
分型鑒定,證實了2004年在廣東發(fā)生的登革熱疫情為I型
登革病毒;也有報道應用寡核苷酸芯片技術能同時確認流
感和登革熱病毒[14].長期受這種疾病困擾的地區(qū)將有望通
過這種技術的完善,獲得有效的治療和保護.
()屬于蚊媒傳染病。
A.流行性乙型腦炎(日本腦炎)(正確答案)
B.西尼羅熱
C.瘧疾
D.中東呼吸綜合征(MERS)
正確答案:ABC
依據(jù):《口岸傳染病排查處置技術方案》
經(jīng)蚊子傳播的疾病多達80余種,主要有:
(1)流行性乙型腦炎:主要流行區(qū)在亞洲遠東和東南亞地區(qū),我國華南,華北,東北地區(qū)可見,集中7,8,9三個月發(fā)病.它由病毒引起,經(jīng)蚊傳播,臨床上發(fā)病急,有高熱,意識障礙,驚厥,強直性痙攣和腦膜刺激征,重型患者病后往往有后遺癥.
(2)登革熱和登革出血熱:由登革病毒引起,經(jīng)蚊傳播的急性傳染病.登革熱以發(fā)熱,皮疹,肌肉和骨關節(jié)劇烈酸痛,淋巴結(jié)腫大,白細胞減少等為主要表現(xiàn),病死率低;登革出血熱以發(fā)熱,皮疹,出血,休克等為主要特征,病死率高.目前主要分布在我國南方沿海地區(qū),長江以南為多.
(3)黃熱?。菏屈S熱病病毒所引起的急性傳染病,經(jīng)伊蚊傳播.主要流行于非洲和中南美洲,臨床特征有發(fā)熱,劇烈頭痛,黃疸,出血,蛋白尿.我國尚未發(fā)現(xiàn)本病.
(4)瘧疾:由按蚊傳播,是瘧原蟲傳播引起傳染病,夏季兩季多見,常年可發(fā)病,國內(nèi)多見于長江流域及其以南地區(qū),可遍布全國,北方地區(qū)發(fā)病較少.臨床表現(xiàn)為:間歇性寒戰(zhàn),高熱,出汗,脾腫大,貧血.臨床可分間日瘧疾,三日瘧疾,惡性瘧疾三型.其中惡性瘧疾可侵犯內(nèi)臟,預后不良.
(5)絲蟲?。和ㄟ^蚊蟲叮咬而傳播,在我國僅有斑氏及巴來絲蟲病流行,長江以南地區(qū)流行.絲蟲寄生在淋巴組織,皮下組織或漿膜腔,引起淋巴管炎癥及阻塞,形成象皮腫,腹水等.臨床還有絲蟲熱,肺部嗜酸粒細胞浸潤綜合征等.
(6)黑熱?。菏怯砂昨榷RФ鴤鞑サ?為內(nèi)臟利什曼原蟲引起的地方性傳染病.
因此,滅蚊避蚊是預防蚊媒傳染病的一項重要措施.
望采納
文章名稱:關于GIS技術蚊媒傳染病的信息
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